血清使用和處理中的常見問題

　　1.保存血清的方法

　　建議血清應(yīng)保存在-5℃至-2O℃。若存放于4℃時，請勿超過一個月。一次無法用完一瓶，建議您無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍。

　　2.如何解凍血清才不會使產(chǎn)品品質(zhì)受損

　　將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融。但必須注意的是，融解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。

　　3.血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn)，該如何處理

　　血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因，但普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成，血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后，也會存在于血清中，亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物，并不影響血清本身的品質(zhì)。

　　欲去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi)離心，上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物，因為它可能會阻塞您的過濾膜。

　　4.為什么要熱滅活血清

　　加熱可以滅活補體系統(tǒng)。啟動的補體參與溶解細(xì)胞事件，刺激平滑肌收縮，細(xì)胞和血小板釋放組胺，啟動淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。在免疫學(xué)研究，培養(yǎng)ES細(xì)胞，昆蟲細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時，推薦使用熱滅活血清。

　　5.有必要做熱滅活嗎

　　實驗顯示，經(jīng)過正確處理的熱滅活血清，對大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對細(xì)胞的生長只有微小的促進(jìn)，或沒有任何作用，甚至通常因為高溫處理影響了血清的品質(zhì)，而造成細(xì)胞生長速率的降低。而經(jīng)過熱處理的血清，沉淀物的形成會顯著的增多，這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察，如同“小黑點"，常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染，而把血清放在37℃環(huán)境中，又會使此沉淀物更增多，使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴增。因此，除非必須，盡可能不需要做熱處理這一步。

　　6.為什么儲存在冰箱中的胎牛血清會出現(xiàn)沉淀

　　儲存在2-8℃時，血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。這應(yīng)該不會影響血清的品質(zhì)。建議在-20℃儲存胎牛血清，避免反復(fù)凍融。

　　7.如何避免沉淀物的產(chǎn)生

　　解凍血清時，請按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫)，若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃)，實驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。解凍血清時，請隨時將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生。  請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害，而影響血清的品質(zhì)。血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無須做此步驟。若必須做血清的熱滅活，請遵守56℃，30分鐘的原則，并且隨時搖晃均勻。溫度過高，時間過久或搖晃不均勻，都會造成沉淀物的增多。

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